奶牛隱形乳房炎是奶牛發(fā)生最多的一種亞臨床型乳房炎，乳房和乳汁無肉眼可見異常，但在乳汁檢查中的體細(xì)胞數(shù)往往增加，乳中能檢出致病菌。隱形乳房炎流行面廣，是臨床型乳房炎發(fā)展的基礎(chǔ)。由于隱形乳房炎無臨床癥狀表現(xiàn)，往往被忽視。奶牛乳房炎的發(fā)病原因眾多，微生物的侵入是引發(fā)乳房炎的主要原因，包括細(xì)菌、支原體和病毒等，主要由革蘭氏陽性菌引起。為了解某規(guī)模奶牛場(chǎng)隱形乳房炎的發(fā)生情況，對(duì)該奶牛場(chǎng)無奶牛乳房炎臨床癥狀的泌乳期奶牛進(jìn)行檢測(cè)。現(xiàn)將調(diào)查情況匯報(bào)如下。

    1  材料與方法

   （1）奶牛乳房炎的排查。用C.M.T診斷試劑對(duì)165份無乳房炎臨床癥狀泌乳期奶牛進(jìn)行隱形乳房炎排查。隨機(jī)選取無乳房炎臨床癥狀的泌乳期奶牛的乳樣加入到診斷盤中，傾斜診斷盤45°，流出多余乳汁，加入等量C.M.T診斷液，然后平持診斷盤旋轉(zhuǎn)動(dòng)，使診斷液與乳汁充分混合，于10秒后觀察結(jié)果。乳汁無變化，不出現(xiàn)凝塊為陰性；有微量沉淀，但不久消失為可疑；部分形成凝膠塊為弱陽性；完全形成凝膠塊，轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)凝膠向中央集中，停止轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)凝塊呈凹凸附著于盤底為陽性。完全形成凝膠塊，轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)凝塊向中央集中，停止轉(zhuǎn)動(dòng)則恢復(fù)原狀，并附著于盤底。

   （2）乳樣的采集。針對(duì)C.M.T 檢測(cè)呈現(xiàn)陽性的奶牛進(jìn)行乳樣收集，先用消毒液清洗乳房，棄去頭3把奶，然后以無菌操作方式擠下約10mL左右奶樣于滅菌試管中加蓋密封， 共收集25份陽性乳樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

   （3）細(xì)菌的分離培養(yǎng)。將所采集乳樣搖勻后，無菌取適量試管中部乳樣，涂布于鮮血平板瓊脂上，37℃培養(yǎng)24小時(shí)，觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況及其菌落特征。挑取典型菌落，革蘭氏染色鏡檢，根據(jù)菌體形態(tài)及染色特性初步判定細(xì)菌類屬，并將其進(jìn)一步純化培養(yǎng)和生理生化鑒定。

   （4）生化試驗(yàn)。將分離到的細(xì)菌接種到相應(yīng)的生化鑒定培養(yǎng)基中，分別進(jìn)行培養(yǎng)特性和生理生化鑒定，葡萄球菌通過乳糖試驗(yàn)、兔血漿凝固酶試驗(yàn)、過氧化氫酶試驗(yàn)、甘露醇試驗(yàn)等進(jìn)行判定；鏈球菌進(jìn)行溶血試驗(yàn)、美蘭牛乳試驗(yàn)、七葉苷水解試驗(yàn)、馬尿酸鈉和血清菊糖發(fā)酵試驗(yàn)等進(jìn)行判定。

   （5）藥敏試驗(yàn)。采用藥敏紙片法對(duì)主要病原菌進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，即將分離鑒定的主要病原菌分別均勻涂布于鮮血瓊脂平板上，然后貼藥敏紙片于其上，置37 ℃培養(yǎng)24小時(shí)，測(cè)量抑菌圈直徑。所選抗菌藥有青霉素、氟哌酸、先鋒霉素V、紅霉素、慶大霉素、利福平、丙氟哌酸、卡那霉素、紅霉素和鏈霉素共10種。

    2  結(jié)果與分析

   （1）細(xì)菌分離鑒定結(jié)果。對(duì)25份陽性乳樣進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)和鑒定，分離到各種細(xì)菌43株，其中革蘭氏陽性菌37株，所占比例為77.08%，其他菌占22.92%。在所分離的37株革蘭氏陽性球菌中，葡萄球菌21株、鏈球菌16株。由此可以看出，該規(guī)模奶牛場(chǎng)隱形乳房炎的病原菌主要是葡萄球菌，其次是鏈球菌。

   （2）藥敏試驗(yàn)結(jié)果。對(duì)主要病原菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果表明葡萄球菌和鏈球菌對(duì)丙氟哌酸、氟哌酸、先鋒霉素V類藥物高度敏感，選擇敏感性較高的藥物對(duì)隱型乳房炎主要致病菌具有良好的抑菌效果，而臨床上常用的抗生素如青霉素類和鏈霉素類等的抑菌效果很差。

    3  討論

   （1）通過對(duì)該規(guī)模場(chǎng)奶牛乳樣的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)引起該規(guī)模場(chǎng)奶牛隱形乳房炎的主要病原菌是葡萄球菌，其次是鏈球菌。這與已經(jīng)報(bào)道的引起隱形乳房炎致病菌中的菌種一致。引起奶牛隱形乳房炎的發(fā)生與牛場(chǎng)的衛(wèi)生條件和環(huán)境因素有關(guān)，保持良好的環(huán)境衛(wèi)生，對(duì)防止奶牛乳房炎有著重要意義。牛舍運(yùn)動(dòng)場(chǎng)地應(yīng)清潔、干燥，及時(shí)清理糞便、積水。定期對(duì)運(yùn)動(dòng)場(chǎng)和牛舍進(jìn)行消毒，乳房炎高發(fā)季節(jié)就加強(qiáng)消毒。牛舍要通風(fēng)良好，夏季防暑降溫，冬季要防風(fēng)保暖，減少環(huán)境應(yīng)激反應(yīng)，消除環(huán)境因素影響，提高奶牛免疫力，才能有效地預(yù)防和控制奶牛隱形乳房炎的發(fā)生與流行。

   （2）引起隱形乳房炎的主要病原菌對(duì)臨床上常用的抗生素如青霉素類、鏈霉素類等的抑菌效果很差，說明病原菌已有很強(qiáng)的耐藥性，抗生素作為治療藥物在奶牛乳房炎的控制中起了重要作用，但抗生素的殘留導(dǎo)致奶制品的污染。加強(qiáng)奶牛場(chǎng)衛(wèi)生安全意識(shí)，盡量少用或不用各類抗生素類藥物。對(duì)隱形乳房炎的發(fā)病奶牛可采用中草藥治療或中西結(jié)合療法進(jìn)行治療。應(yīng)定期檢測(cè)奶牛，及時(shí)發(fā)現(xiàn)隱形乳房炎病牛，并及早治療。加強(qiáng)疾病的預(yù)防，按規(guī)定接種疫苗，如接種金黃色葡萄球菌疫苗，降低乳房炎發(fā)生率，有效控制該病的發(fā)生。

   （杜海燕  河南省新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心；韓俊偉、李磊、常衛(wèi)波  河南省新鄉(xiāng)市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所）